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Advantage Genomic LA Polymerase Mix and Advantage GC Genomic LA Polymerase Mix- "길고 정확한" PCR 증폭- 에러가 거의 없는 PCR 산물- 최대 41 kb까지 target 증폭- Advantage GC Genomic LA Polymerase Mix는 복잡한 구조와 GC-rich genome 주형에 최적Advantage Genomic LA Polymerase Mix 및 Advantage GC Genomic LA Polymerase Mix는 일반적인 PCR 효소에서는 증폭이 어려운 복잡한 구조나 GC 함량이 높은 주형 등 매우 다양한 주형에서 긴 단편의 정확한 증폭이 가능한 PCR 효소이다.
두 제품은 모두 Advantage Genomic LA Polymerase를 사용한다. Advantage Genomic LA Polymerase는 완전한 길이의 내열성 Taq DNA polymerase와 소량의 proofreading 효소 및 hot start antibody가 포함되어 있다. Proofreading 효소가 가지는 3′→5′exonuclease 활성은 잘못 삽입된 염기를 제거하고 지속적으로 신장 반응을 진행하여 긴 사슬 DNA 단편의 증폭이 가능하다. Advantage GC Genomic LA Polymerase Mix는 Clontech 고유의 GC-Melt Reagent가 포함되어 있으며, GC 함량이 높은 서열의 증폭을 극적으로 향상시킨다. 이 PCR 효소를 이용하면 human genomic DNA를 주형으로 30 kb까지 (GC 함량이 높은 경우는 20 kb) 또한 복잡하지 않은 일반적인 주형의 경우 48 kb 이상의 증폭이 가능하다(Figure 1, 3).
3′→5′exonuclease 활성을 가지는 이 혼합 효소는 wild-type Taq DNA Poly merase보다 6.5 배 더 높은 정확성을 나타낸다 (internal data는 reference 1 에서 얻었다). 이 강력한 효소 시스템은 background를 최소화하며, 매우 높은 증폭효율을 보장하고, 다른 종류의 "long and accurate" polymerase에 비하여 PCR 조건 검토가 용이하다. 또한, 두 제품에 첨부된 버퍼는 높은 증폭효율과 정확성을 향상시키는데 최적화되어 있다.
Hot start antibody는 실온에서는 DNA polymerase 활성을 저해하여 자동으로 hot start PCR을 할 수 있다. PCR 초기 변성 과정에서 antibody가 변성되면 polymerase의 활성이 복원되며, hot start antibody는 PCR 시작 전에 비특이적 증폭 및 잘못된 primer 산물을 감소시키거나 제거하여 PCR 효율과 반응 특이성을 크게 향상시킨다. 또한, Advantage GC Genomic LA Polymerase Mix로 증폭된 PCR 산물들은 3′→A 돌출이 있어 TA-vector에 cloning이 가능하다.
韩国
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